大豆胰蛋白酶抑制因子检测

大豆作为优质的植物蛋白，成为了人和动物必须的氨基酸来源，但是大豆中也还有许多对人体有害的物质，比如大豆抗营养因子，大豆抗营养因子包含大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白、大豆凝集素、大豆胰蛋白酶抑制因子、单宁、尿酸等，今天我们主要来讲讲大豆抗营养因子中的大豆胰蛋白酶抑制因子

大豆胰蛋白酶抑制剂(soybean trypsin inhibi-tor,STI)是一种多肽类或蛋白质。它对植物本身具有保护作用，主要存在于大豆的子叶中，可防止大豆籽粒自身发生分解代谢，使种子处于休眠状态，能调节大豆蛋白的合成与分解，并具有抗虫作用。然而大豆胰蛋白酶抑制剂具有抗营养作用，主要表现在抑制胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶活性、降低蛋白质消化吸收和造成胰腺肿大。此外，它还具有一定的致敏性。首次报道有呼吸紊乱的大豆过敏患者血清中含有大豆胰蛋白酶抑制剂的特异性IgE抗体。

蛋白质类蛋白酶抑制因子按其结构组成分为：Kunitz胰蛋白酶抑制因子(Kunitz trypisin inhibitor,KTI，或者库尼茨胰蛋白酶抑制因子)和Bowan-Birk蛋白酶抑制因子（Bowman-Birk inhibitor、BBI、或称为鲍曼·伯克胰蛋白酶抑制因子），约占大豆种子蛋白质干重的2%，在生大豆中的含量约为3%。KTI含量居多，生大豆抗营养作用的40%来自于KTI。因此，KTI含量的高低在很大程度上决定了大豆所具有的抗营养作用的强弱。胰蛋白酶抑制因子检测（KTI）技术起着至关重要的作用。

 

大豆胰蛋白酶抑制因子检测

大豆胰蛋白酶抑制因子主要检测，豆粕、发酵豆粕，主要是用于动物营养研发中的发酵豆粕工艺优化，研发出最为优质的发酵工艺，去除豆粕中的大多数的大豆胰蛋白酶抑制因子。

大豆胰蛋白酶抑制因子检测方法

大豆胰蛋白酶抑制因子检测目前主要使用ELISA酶联免疫检测法，使用大豆胰蛋白酶抑制因子检测试剂盒
1. 提取：称取样本 0.30g 加 30mL1×样本提取工作液，25℃提取 16h
2. 稀释：4000rpm 离心 5min，用样本稀释液稀释 30 倍，混匀待检
3. 加样：加入校准品/待测样本 50L，抗体工作液 50L，37℃孵育 10min
4. 洗板：用 1×洗涤工作液洗板 4 次，拍干
5. 加酶：加入酶标试剂 100L/孔，37℃孵育 10min
6. 洗板：用 1×洗涤工作液洗板 4 次，拍干
7. 显色：加入显色液 100L/孔，37℃孵育 10min
8. 终止：加终止液 100L/孔，酶标仪读数
9. 计算：数据带入计算软件

大豆胰蛋白酶抑制因子检测试剂盒组成

30×浓缩样本提取液：50mL
大豆胰蛋白酶抑制因子样本稀释液：100mL
20×浓缩洗液：50mL
大豆胰蛋白酶抑制因子检测板：96T
大豆胰蛋白酶抑制因子校准品（1～5）：各 1.5mL
大豆胰蛋白酶抑制因子抗体工作液：8mL
大豆胰蛋白酶抑制因子酶标试剂：14mL 显色液：14mL
终止液：14mL 盖板膜 3 张、质检报告 1 份、说明书 1 份

 

最后更新时间：2023-07-13 11:09:52