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β-伴大豆球蛋白酶联免疫法定量测定检测

发布时间:2022-05-31 10:50 作者:龙科新域

β-伴大豆球蛋白酶联免疫法定量测定检测

大豆营养物质丰富,其中蛋白质占整个籽粒的35%,脂肪占比16%,各类脂肪酸占比15%,碳水化合物占比34%左右。而β-伴大豆球蛋白占蛋白质中的30%左右,大多数的β-伴大豆球蛋白均可以被肠道吸收利用,只有小部分可以因子人和动物过敏反应,β-伴大豆球蛋白中的α和α'亚基具有抗原性通过IgE介导速发型过敏反应作用致敏反应的机理。

 

β-伴大豆球蛋白定量检测

 

β-伴大豆球蛋白酶试剂盒采用间接竞争 ELISA 方法,在酶标板微孔条上预包被β-伴大 豆球蛋白抗原,样本中的β-伴大豆球蛋白和预包被的抗原竞争β-伴大豆球 蛋白抗体,加入酶标二抗后,用 TMB 底物显色,样本吸光度值与其所含β- 伴大豆球蛋白的含量呈负相关,与标准曲线比较即可得出样本中β-伴大豆球 蛋白的含量。

β-伴大豆球蛋白检测样本类型

大豆及其深加工产品(如: 豆粕、发酵豆粕、膨化大豆、大豆分离蛋白、 大豆浓缩蛋白等)

β-伴大豆球蛋白定量测定

 

β-伴大豆球蛋白酶联免疫定量试剂盒技术参数

检测范围: 3mg/g~200mg/g 反应温度: 37℃ 反应时间: 30min

校准品 1~5 设定浓度分别为:

0mg/mL 、3mg/mL 、12mg/mL 、50mg/mL 、200mg/mL。

样本在前处理过程中稀释了 7000 倍,校准品实际浓度为设定浓度的 1/700

β-伴大豆球蛋白定量检测

 

β-伴大豆球蛋白酶联免疫定量试剂盒组成

30×浓缩样本提取液: 50mL 20×浓缩洗液: 50mL

β-伴大豆球蛋白检测板: 96T β-伴大豆球蛋白校准品( 1~5):各 1.5mL

β-伴大豆球蛋白抗体工作液: 8mL β-伴大豆球蛋白酶标试剂: 14mL

显色液: 15mL 终止液: 15mL

盖板膜 3 张、质检报告 1 份、说明书 1 份

β-伴大豆球蛋白酶联免疫ELISA定量检测实验步骤

1. 提取: 称取样本 0.30g 加 30mL1×样本提取工作液,37℃振荡提取 1h

2. 稀释: 4000rpm 离心 5min ,用蒸馏水稀释 70 倍,混匀待检

3. 加样: 加入校准品/待测样本 50L ,抗体工作液 50L ,37℃孵育 10min

4. 洗板: 用 1×洗涤工作液洗板 4 次,拍干

5. 加酶: 加入酶标试剂 100L/孔,37℃孵育 10min

6. 洗板: 用 1×洗涤工作液洗板 4 次,拍干

7. 显色: 加入显色液 100L/孔,37℃避光孵育 10min

8. 终止: 加终止液 100L/孔,酶标仪读数

9. 计算: 数据代入计算软件


最后更新时间:2022-09-15 13:14:35

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