天津
龙科新域生物技术有限公司出品
呕吐毒素主要成分为DON（deoxynivalenol），，化学名为3α, 7α, 15一三羟基草镰孢菌-9-烯-8-酮，是一种单端孢霉烯的族化合物。而单端孢霉烯族毒素一共有150多种，呕吐毒素（DON）是单端孢霉烯族毒素中最重要的一种毒素。呕吐毒素主要是来自于镰刀菌属，包括为禾谷镰刀菌和黄色镰刀菌。 呕吐毒素DON对于粮食谷物类的污染状况与产生毒素的菌株、温度、湿度、通风、日照等因素有关。主要污染物有小麦、大麦、燕麦、玉米等谷类作物；面包、饼干、麦制点心等粮食制品；动物的奶、蛋中等。小麦赤霉病主要分布在潮湿温带地区，我国大部分地区又处于这一地带，所以造成呕吐毒素DON污染较严重，而在多雨年份地区污染状况则更为严重，这给饲料企业以及养殖业主带来了很大的损失，人们食用含有呕吐毒素的食物会危害到人体健康。
呕吐毒素检测原理
本试剂采用量子点荧光竞争法定量检测样本中呕吐毒素的浓度。应用量子点免疫层析技术，以条状纤维层析材料为固相，通过毛细作用使样品溶液到达指定位置反应。检测时，样品中的呕吐毒素与量子点标记的特异性抗体结合，抑制抗体与检测线（T 线）上的DON-BSA偶联物之间的结合，导致T线荧光值 变化，通过T线荧光值信号的高低来计算呕吐毒素的含量。
呕吐毒素检测范围
玉米、玉米副产品、小麦、麸皮、菜粕、棉粕、花生粕、部分成品饲料
呕吐毒素技术指标
检测范围：100-5000 μg/kg ( ppb ),
最低检出限： 100 μg/kg ( ppb )
呕吐毒素检测产品组成
需自备仪器耗材：电子天平、离心机、粉碎机、
50ml离心管或锥形瓶、振荡器、10~100μL移液器、 50-1000 μL移液器及吸头、龙科新域多通量荧光检测平台。（注：配套仪器及相关耗材可来电咨询。）
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名称 |
数量 |
名称 |
数量 |
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微孔条 |
8T×5 |
试剂桶 |
5个 |
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样品稀释液 |
20mL /瓶×1瓶 |
检测试剂条 |
40条 |
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说明书 |
1 份 |
龙科新域呕吐毒素检测试剂盒使用前注意事项
1.请在环境温度22~27℃下操作。
2.试剂条和微孔极易受潮，打开小包装后应立即使用。
3.请使用配套的卡托装条检测。
4.样品提取液为易挥发液体，不用时请拧紧瓶盖。
5.请勿使用自来水、纯化水作为阴性对照，可以用稀释液作为阴性对照。
6.免疫层析试纸条与ELISA法试剂盒为属于快检试剂，检测结果仅供初步筛选使用，不做最终判定，如需准确定量，请使用标准判定方法进一步确认。
呕吐毒素荧光定量检测卡操作流程
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步骤 |
具体操作说明 |
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校准 |
我们提供给您免费校准品用于试验校准，操作方法可直接跳过提取操作步骤从稀释开始进行。请在实验前先将设备与配套试剂进行校准后在进行试验，这样您每次试验都会得到更满意的结果，建议您至少每个试剂盒进行一次校准,如有异常请联系厂家。 |
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准备 |
1 提前至少30分钟打开多功能孵育器预热。
2 取代表性样品≥1kg进行粉碎过20目筛，混合均匀。
3 配制50%乙醇（提取液）：1∶1（v/v）乙醇/水。
4 将微孔条放至孵育器载架微孔中，吸取100ul样本稀释液加到微孔中，插入相对应项目的试纸条放置载架上备用。
提示：粉碎后的样本不能出现颗粒状（可过20目筛），如存在请延长粉碎时间或过筛。常规检测每份样本需要40ml提取液。孵育器需要提前预热，预热不充分会导致检测结果偏高的可能。请使用双蒸水或纯化水配液。 |
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提取 |
称取5.00g样本加入40ml 提取液，涡旋震荡3分钟，之后静置3分钟以上（静置是为了更好的吸取提取后上清液，如果样本量不多可采取离心或过滤以加速此过程）。
提示：提取时可以将样本放在50ml离心管中震荡也可使用锥形瓶，如瓶子较大可多称取样本，再按照料液比1:8比例进行提取。提取液为50%乙醇。样品提取液及样品稀释液均为通用试剂，可与龙科品牌荧光定量检测产品共用。震荡充分很重要，可以使用摇床，要保证震荡充分，摇床或手摇提取时间大于10分钟。 |
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稀释 |
将400μL样品稀释液加入到离心管中，再从静置后的样本提取液中吸取100μL上清液加到离心管中充分震荡后，7000rpm离心1分钟（或4000转速离心5分钟）。
提示：如果检测结果超出检测范围,请用样本提取液进行稀释,建议稀释2倍,稀释倍数越大,检测误差越大。 |
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上样 |
吸取离心后上清液100ul加入到微孔中吹打混匀10次以上。 |
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孵育 |
旋转孵育器闭合钮，检测卡落下，准确计时 7min后将检测卡取出插入读数仪1min内判读结果。
注意事项：孵育器需要提前至少30min预热。孵育器自带关盖自动计时功能，期间请不要随意打开孵育器上盖。 |
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结果 |
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读取IC卡：将IC卡放置于读数仪右上角读卡区，点击扫描按钮即可录入数据（该步骤提前操作，每盒扫描一次即可）。
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将三联检测卡推入卡槽中，选择对应的卡托通道“检测”下拉菜单中选择“DON”按钮点击“开始检测”按钮，读数仪会自动进卡读值。（龙科新域读数仪具有数据一键导入U盘，查看历史数据、打印数据、质控对照等功能具体使用可联系我们）
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呕吐毒素快速检测试剂盒保藏方法
4-28℃ 避光干燥保存
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呕吐毒素相关标准 |
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样本基质 |
检测限 |
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植物性饲料原料 |
<5mg/kg |
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犊牛、羔羊、泌乳期精料补充料 |
<1mg/kg |
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其他精料补充料 |
<3mg/kg |
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猪配合饲料 |
<1mg/kg |
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其他配合饲料 |
<3mg/kg |
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烟台基地：中国（山东）自由贸易试验区烟台片区烟台开发区珠江路32号
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最后更新时间：2023-07-13 11:09:46
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