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黄曲霉毒素B1荧光定量检测卡使用说明

发布时间:2022-03-10 15:10 作者:龙科新域

黄曲霉毒素B1简介

黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,简写为AFB1),化学式为C17H12O6,纯品为无色结晶,相对分子量为312.27,难溶于水而易溶于油及多种极性有机溶剂,如氯仿、甲醇、乙醇、丙醇、乙二甲基酰胺,不溶于石油醚、乙醚和己烷。黄曲霉毒素B1在已知的化学物质中致癌力居首位。主要危害器官:肝脏危害特点:动物抵抗力降低;生长性能下降;产蛋率降低、畸形蛋;动物中毒死亡; 畜产品中残留不同动物对黄曲霉毒素的敏感性鸭雏>火鸡雏>鸡雏,仔猪>犊牛>肥育猪>成年牛>绵羊。黄曲霉毒素B1存在于土壤,动植物各种坚果,特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素。一般以热带和亚热带等南方高温、高湿地区受污染最为严重,食品中黄曲霉毒素的检出率比较高。

黄曲霉毒素检测原理

本试剂采用量子点荧光竞争法定量检测样本中黄曲霉毒素B1的浓度。应用量子点免疫层析技术,以条状纤维层析材料为固相,通过毛细作用使样品溶液到达指定位置反应。检测时,样品中的黄曲霉毒素B1与量子点标记的特异性抗体结合,抑制抗体与检测线(T 线)上的B1-BSA偶联物之间的结合,导致T线荧光值 变化,通过T线荧光值信号的高低来计算黄曲霉毒素B1 的含量。

黄曲霉毒素检测范围

玉米、玉米副产品、小麦、花生等谷物类制品。

黄曲霉毒素技术指标

检测范围:1-30 μg/kg ( ppb );2-60μg/kg ( ppb )
最低检出限: 1 μg/kg ( ppb )
【产品组成】
需自备仪器耗材:电子天平、离心机、粉碎机、
50ml离心管或锥形瓶、振荡器、10~100μL移液器、 50-1000 μL移液器及吸头、龙科新域多通量荧光检测平台。(注:配套仪器及相关耗材可来电咨询。)


名称  数量  名称  数量
微孔条  8T×5  试剂桶  5个
样品稀释液  20mL /瓶×1瓶  检测试剂条  40条
说明书 1份


黄曲霉毒素检测使用前注意事项

黄曲霉毒素检测试剂盒
1 . 请在环境温度22~27℃下操作。
2. 试剂条和微孔极易受潮,打开小包装后应立即使用。
3. 请使用配套的卡托装条检测。
4. 样品提取液为易挥发液体,不用时请拧紧瓶盖。
5. 请勿使用自来水、纯化水作为阴性对照,可以用稀释液作为阴性对照。
6. 免疫层析试纸条与ELISA法试剂盒均属于快检试剂,检测结果仅供初步筛选使用,不做最终判定,如需准确定量,请使用标准判定方法进一步确认。

黄曲霉毒素检测保藏方法

    4-28℃ 避光干燥保存

黄曲霉毒素B1荧光定量检测卡操作流程

步骤 具体操作说明
校准 我们提供给您免费校准品用于试验校准,操作方法可直接跳过提取操作步骤从稀释开始进行。请在实验前先将设备与配套试剂进行校准后在进行试验,这样您每次试验都会得到更满意的结果,建议您至少每个试剂盒进行一次校准,如有异常请联系厂家。
准备 1 提前至少30分钟打开多功能孵育器预热。
2 取代表性样品≥1kg进行粉碎过20目筛,混合均匀。
3 配制50%乙醇(提取液):1∶1(v/v)乙醇/水。
4 将微孔条放至孵育器载架微孔中,吸取100ul样本稀释液加到微孔中,插入相对应项目的试纸条放置载架上备用。
 
提示:粉碎后的样本不能出现颗粒状(可过20目筛),如存在请延长粉碎时间或过筛。常规检测每份样本需要40ml提取液。孵育器需要提前预热,预热不充分会导致检测结果偏高的可能。请使用双蒸水或纯化水配液。
提取 称取5.00g样本加入40ml 提取液,涡旋震荡3分钟,之后静置3分钟以上(静置是为了更好的吸取提取后上清液,如果样本量不多可采取离心或过滤以加速此过程)。
 
提示:提取时可以将样本放在50ml离心管中震荡也可使用锥形瓶,如瓶子较大可多称取样本,再按照料液比1:8比例进行提取。提取液为50%乙醇。样品提取液及样品稀释液均为通用试剂,可与龙科品牌荧光定量检测产品共用。震荡充分很重要,可以使用摇床,要保证震荡充分,摇床或手摇提取时间大于10分钟。
稀释   
 将400μL样品稀释液加入到离心管中,再从静置后的样本提取液中吸取100μL上清液加到离心管中充分震荡后,7000rpm离心1分钟(或4000转速离心5分钟)。 
提示:如果检测结果超出检测范围,请用样本提取液进行稀释,建议稀释2倍,稀释倍数越大,检测误差越大。
上样 吸取离心后上清液100ul加入到微孔中吹打混匀10次以上。
孵育 旋转孵育器闭合钮,检测卡落下,准确计时 7min后将检测卡取出插入读数仪1min内判读结果。
注意事项:孵育器需要提前至少30min预热。孵育器自带关盖自动计时功能,期间请不要随意打开孵育器上盖。
结果
  1. 读取IC卡:将IC卡放置于读数仪右上角读卡区,点击扫描按钮即可录入数据(该步骤提前操作,每盒扫描一次即可)。
  2. 将三联检测卡推入卡槽中,选择对应的卡托通道“检测”下拉菜单中选择“DON”按钮点击“开始检测”按钮,读数仪会自动进卡读值。(龙科新域读数仪具有数据一键导入U盘,查看历史数据、打印数据、质控对照等功能具体使用可联系我们)
 
 

黄曲霉毒素B1相关限量标准

样本基质 检测限
玉米、玉米面(渣、片)、玉米制品 ≤20µg/kg
稻谷、糙米、大米 ≤10µg/kg
小麦、大麦、小麦粉、麦片 ≤5µg/kg
其他去壳谷物(除糙米、大米、小麦粉、玉米面(渣、片)、麦片外) ≤5µg/kg
发酵豆制品 ≤5µg/kg
花生、花生制品 ≤20µg/kg
其他熟制坚果及籽类(除花生外) ≤5µg/kg
植物油脂(花生油、玉米油除外) ≤10µg/kg
花生油、玉米油 ≤20µg/kg
酱油 ≤5µg/kg
食醋 ≤5µg/kg
酿造酱 ≤5µg/kg
婴儿配方食品、较大婴儿和幼儿配方食品 ≤0.5µg/kg
特殊医学用途婴儿配方食品 ≤0.5µg/kg
婴幼儿谷类辅助食品 ≤0.5µg/kg
特殊医学用途配方食品(特殊医学用途婴儿配方食品涉及的品种除外) ≤0.5µg/kg
辅食营养补充品 ≤0.5µg/kg
运动营养食品 ≤0.5µg/kg
孕妇及乳母营养补充食品 ≤0.5µg/kg

 

最后更新时间:2022-09-15 13:14:30

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